Seleção em gradiente de Percoll® sobre os parâmetros espermáticos do sêmen bovino congelado

Resumo

Na produção in vitro de embriões, técnicas de seleção espermática são usadas, dentre elas, o gradiente descontínuo de Percoll®. O objetivo foi avaliar a integridade da membrana plasmática (eosina-nigrosina), do acrossomo (trypan blue- Giemsa – TBG, lecitina do amendoim conjugada ao isotiocianato de fluoresceína associado ao iodeto de propídeo - Fitc-PNA/PI) e da cromatina (azul de toluidina), em espermatozóide bovino congelado. Vinte e nove amostras foram analisadas nos momentos pós-descongelação (PD) e pós-Percoll® (PP). As variáveis expressas em porcentagem foram submetidas à análise de variância e foi empregado o teste de Tuckey para a comparação entre médias. O estudo da associação entre variáveis foi feito pelo teste de correlação de Pearson. Constataram-se, entre os momentos PD e PP, diferenças significativas (p<0,05) para a motilidade, integridade de membrana plasmática e número de espermatozóides vivos com acrossomo íntegro (TBG e Fitc-PNA/PI), com maiores valores obtidos PP. O percentual de células com alteração na condensação da cromatina não diferiu entre os momentos estudados. Conclui-se que o gradiente descontínuo de Percoll® foi eficaz na seleção de uma maior população de células móveis, com membranas plasmática e acrossomal íntegras, sem haver alteração na condensação da cromatina nuclear.